1.整个灭菌过程中，必须保证器内有足够的水量。每消毒一次，都要重新加水，绝不允许“干热”；否则极易烧坏仪器，甚至引起爆炸，造成严重事故。为了安全，操作人员不得离开现场。
2.将消毒桶放入主体内，顺序地用力均匀地将相对方位的螺母旋紧，使盖与主体密合。
3.灭菌物品:
1）若物体的体积密度大，导热性能较差，灭菌时间可适当延长。一般来讲，要使其最内层的温度达到121℃；并持续一段时间，才能真正起到灭菌的作用。
2）不同类型的物品不应放在一起进行灭菌。
3）灭菌物品的体积不应包得太大，也不应放得过多，过紧。以免影响蒸汽透入。
4）不耐热的物品以及对金属有腐蚀性的物品不应放入灭菌。
5）未压盖的瓶装溶液，灭菌前，应用耐热橡胶塞（软木塞）将瓶口塞紧后，再用几层纱布压住瓶塞，并在瓶颈外连纱布一起用绳子固定。
6）灭菌开始时，一定要将器内的空气排除干净。否则压力表上的读数，将是空气和水蒸汽两者的压力之和。结果是压力虽然达到了规定的数值而温度却达不到求。
7）灭菌终止后，可按照灭菌物品的不同性质和不同要求，进行快放气，慢放气和自然冷却。
8）如果灭菌物品不会因压力和温度骤然下降面损坏，又要求灭菌后物品要干燥的，可快放气，待压力回至“0”位后，等一分钟，即可开盖，并继续加热5-10分钟，然后取出物品，即达干燥目的。
9）灭菌物品是玻璃器皿，若放气过快，会引起玻璃器皿剧烈震动，温度急剧变化易使玻璃炸裂，故应慢放气。待压力表慢慢降至“0”位后，再将器盖打开少许，让器内温度逐步下降，15分钟以后，才能全开器盖，取出物品。
10）若灭菌物品是压盖瓶装溶液，如果压力和温度骤然降低，会引起溶液剧烈的沸腾，甚至冲开瓶塞，玻璃瓶炸裂。应先关电源，让其自然冷却20—30分钟，以便使瓶内溶液的温度降至100℃以下，然后再放气，待压力表回到“0”位时，再将器盖打开少许，10-15分钟后，才能全开器盖，取出灭菌物品。
11）在未放气，灭菌器内压力尚未降到“0”位以前，绝对不允许打开器盖！否则器内压力很大，灭菌物品将随高压气流一齐冲出，可能伤害人体，造成严重事故。